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發(fā)布時(shí)間： 2017-11-02 點(diǎn)擊次數(shù)： 1686次ELISA試劑盒如果實(shí)驗(yàn)君的實(shí)驗(yàn)樣品為人、小鼠或大鼠樣品，那么要選擇一個(gè)適宜的試劑盒相對(duì)簡(jiǎn)略，但如果您的實(shí)驗(yàn)樣品來歷于其他物種如雞、牛、猴等，則市面上能供應(yīng)的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能供應(yīng)近萬種試劑盒，覆蓋多物種的供貨商。但如果又非要檢測(cè)這些物種的方針時(shí)，要對(duì)待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性剖析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。關(guān)于樣品類型而言，一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的驗(yàn)證。在選擇試劑盒時(shí)，要詳細(xì)閱讀說明書，比如血漿樣本抗凝劑的運(yùn)用是否與試劑盒兼容。另外，在某些景象下樣品中會(huì)存在煩擾要素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因而需根據(jù)樣品來選擇試劑盒，必要時(shí)還要根據(jù)樣本來恰當(dāng)優(yōu)化?；蛟跇悠肥占?，先閱讀一些可靠供貨商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細(xì)胞裂解物，則需求更穩(wěn)重的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒有經(jīng)過多種來歷組織樣本的驗(yàn)證。這需求實(shí)驗(yàn)君能了解不是全部試劑盒所用的抗體對(duì)，都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白，還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。但如果實(shí)驗(yàn)君要了解組織樣品的制備問題，我們另起一文來總結(jié)。
ELISA試劑盒如果實(shí)驗(yàn)君關(guān)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參看的數(shù)據(jù)，選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)規(guī)劃的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低，主張選擇高靈敏度的試劑盒。為了下降基質(zhì)效應(yīng)，有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過試劑盒的檢測(cè)規(guī)劃（標(biāo)曲規(guī)劃）， 也需做恰當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋。在zui終計(jì)算結(jié)果時(shí)，需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
一般來說，商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供貨商的試劑盒對(duì)樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很名貴或較難獲取，則需求細(xì)心考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求。如果樣品量少，且要做多因子檢測(cè)時(shí)更需穩(wěn)重。
詳盡比較科研ELISA試劑盒要害性技術(shù)參數(shù)
ELISA試劑盒的要害技術(shù)參數(shù)包括板內(nèi)差異性、板間差異性、批間差異性、重復(fù)性、特異性及交叉反應(yīng)性、回收率等。如果實(shí)驗(yàn)君常常打開ELISA實(shí)驗(yàn)，主張運(yùn)用同一廠家的試劑盒，這樣可盡量確保數(shù)據(jù)的重復(fù)性(當(dāng)然條件是實(shí)驗(yàn)條件的一致性)。關(guān)于科研用的定量ELISA試劑盒，不同的生產(chǎn)廠家運(yùn)用的抗體對(duì)、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研發(fā)實(shí)力不盡相同，天然不同廠家試劑盒測(cè)出的數(shù)據(jù)會(huì)有差異。